Kit de test rapide de sécurité alimentaire pour la détection d'Escherichia coli entérohémorragique (EHEC) avec réactif PCR en temps réel lyophilisé, sans chaîne du froid

1.Définition

Escherichia coli entérohémorragique(EHEC) est un groupe deE. colisouches capables de provoquer une diarrhée hémorragique et une entérite chez l'homme, le sérotype O157:H7 étant la souche la plus représentative.lait cru, de la volaille et de ses produits, ainsi que des fruits et légumes, la viande bovine étant le principal vecteur de transmission.

Ce produit est un réactif de PCR en temps réel lyophiliséPour le détection deLes espèces d'Escherichia coliO157:H7. Il utilise le hautement conservé RfbE génétique deLes espèces d'Escherichia coliO157:H7 comme cible de détection. Il s'agit d'un mastermix contenant tous les ingrédients nécessaires, à l'exception de l'ADN modèle, et il est pré-distribué sous forme de test unique dans des tubes PCR pour une utilisation facile.Ce produit ne nécessite pas de chaîne de froid pour le transport et le stockage, ce qui réduit considérablement les coûts d'expédition et élimine les éventuelles pertes dues au gaspillage de réactifs et à la contamination par aérosol.

2. Spécifications et composition

3. stockage Et la durée de conservation

Réserveà température ambiante 5 à 30°C). Il est stable jusqu'à 12 mois.. Une fois l'emballage sous vide ouvert, veuillez ranger les produits non utilisés dans le sac en plastique recouvre-bouchon fourni avec les déséchants.etdans le sac en feuille d'aluminium. 

Attention: 

La diminution de la taille de la pellette de réactif indique que l'humidité s'infiltre dans le tube et que le réactif est humidifié.Tous les réactifs dont la taille des granulés est nettement inférieure à la normale doivent être éliminés ou soumis à un test de contrôle positif avant utilisation. pour les essais par échantillonnage.

4. ÉQUIPEMENTES et réactifs supplémentaires requis

1) LeInstruments de PCR en temps réel

2) LeJe vous en prie.Leset les pourboires

3) Les produitsNucléase-de l'eau libre

4) Les produitsKit d'extraction d'acide nucléique

5. Systèmes PCR compatibles en temps réel

ABI 7500/Fast, Roche LightCycler 480II, BioRad CFX96, Bioer LineGene 9600 et autres appareils électroniques.

6. échantillons acceptables

Bouillon d'enrichissement alimentaire, vomissements, échantillons de diarrhée, etc.

7. PROCEDURE de l' opération

1) LeLe nucléaireUneCIDE- Je ne sais pas.

ExtraitL' ADNà partir d'échantillons utilisant un kit d'extraction approprié.Il est recommandé que leL' ADNest élué avec environ 100 μl de tampon d'élution(TE ouH sans nucléase₂Je vous en prie.)dans la dernière étape deextraction.L' acide nucléique purifié doit être utilisé immédiatement ou conservé à -20°C.

2) LePréparation du contrôle positif

Le contrôle positif peut être stocké à température ambiante avant la réhydratation. pour une durée maximale de 12 mois.Ça.doit être réhydraté avant utilisationen ajoutant250μlde tampon TE ou nsans éclairageH est₂Je suis désolé.utilisez immédiatement ou conservezà -20°C.

3) Les produitsPCR en temps réel- Je ne sais pasIXPréparation

A) Ouvrez l'emballage sous vide et retirez la bande de 8 tubessVérifiez que la pelle est au fond du tube. (Réduire le nombre de tubes selon les besoins sinécessaire)Si les tubes fournis ne sont pas compatibles avec votre instrument, transférer la pelle de réactif dans un tube optique compatible avec votre instrument.

B) Ouvrez les tubes et jetez le capuchon (non adapté aux machines de PCR en temps réel) et préparez le mélange de réaction sur glace comme ci-dessous.

* L'eau sans nucléase peut être utilisée comme témoin négatif.

C) LesLe test de dépistage de la PCR doit être effectué en utilisant des capsules (bandes) adaptées à la PCR en temps réel.(non fourni).

D) Faire tourner les tubes à basse vitesse pendant 10 à 15 secondes, centrifuger à 3000 tr/min pendant 20 secondes et les placer dans un instrument de PCR en temps réel.

4) Les produitsRéglage RT-PCR

Réglez le volume de réaction à 25 μl et la procédure d'amplification par PCR comme indiqué ci-dessous. fluorescence à 60°C, et sélectionnez NONE comme référence passive.

5) Les produitsRésultatUneanalyseetJe suis...Interprétation