Réactif de détection PCR en temps réel lyophilisé pour la détection hautement sensible de Listeria monocytogenes sans chaîne du froid

LyoDt^® Réactif de détection PCR en temps réel lyophilisé pour Tests

Mode d'emploi1. DESCRIPTION

Listeria monocytogenes,

TestsCe produit est un réactif PCR en temps réel lyophilisé pour la

détection de Listeria monocytogenes .TestsC de  Listeria monocytogenes comme cible de détection.Tests 2. SPÉCIFICATIONS ET COMPOSITION Réf.

Description

Conserver  à température ambiante

(5-30°C )60°CComposantC Une fois l'emballage sous vide ouvert, veuillez conserver les produits non utilisés dans le sachet plastique refermable fourni avec les dessiccateurs, C  dans le sachet en aluminium.ATTENTION :La diminution de la taille du granulé de réactif est une indication de l'infiltration d'humidité dans le tube et le réactif est humidifié. Tout réactif dont la taille du granulé est significativement inférieure à la normale doit être jeté ou testé avec un contrôle positif avant utilisation 

pour le test d'échantillon 

.    4. ÉQUIPEMENTS ET RÉACTIFS SUPPLÉMENTAIRES REQUIS1) 

Appareil PCR en temps réel

APip

Le contrôle positif peut être conservé à température ambiante avant la réhydratation et pointes3) Eau exempte de

ix nucléase4) Kit d'extraction d'acides nucléiques

à 60°C et sélectionner AUCUN comme référence passive.ABI 7500/Fast, Roche LightCycler 480II, BioRad CFX96, Bioer LineGene 9600

.

6. ÉCHANTILLONS ACCEPTABLESC

7. PROCÉDURE OPÉRATOIRE

1) 

Nucléique

Acide IxtractionExtraire l'ADN

 des échantillons à l'aide d'un kit d'extraction approprié. Il est recommandé que l'ADN soit élué avec environ 100μl de tampon d'élution (TEnécessaireH sans nucléase 2O _{à -20} dans la dernière étape de l'Composant. L'acide nucléique purifié doit être utilisé immédiatement ou conservé à -20°C. doit être réhydraté avant utilisation Préparation du contrôle positif

Le contrôle positif peut être conservé à température ambiante avant la réhydratationjusqu'à 12 mois

.  Il doit être réhydraté avant utilisation en ajoutant 250 μl de tampon TE ou H sansnucléase2O, vortexer à faible vitesse pendant 15 à 20 secondes et centrifuger à faible vitesse pendant 15 à 20 secondes. Utiliser immédiatement ou conserver _{à -20}°C.3) 60°CC

ix PréparationA) Ouvrez l'emballage sous vide et sortez la barrette de 8 tubess contenant le réactif. Vérifiez que le granulé se trouve au fond du tube

(Coupez le nombre de tubes selon les besoinssi  nécessaire) . Si les tubes fournis ne sont pas compatibles avec votre instrument, transférez le granulé de réactif dans un tube optique compatible avec votre instrument.B) Ouvrez les tubes et jetez le(s) bouchon(s) (ne convient pas aux machines PCR en temps réel), et préparez le mélange réactionnel sur de la glace comme ci-dessous.ComposantVol. /test

Réactif lyophilisé

(non fournis).

D) Vortexer les tubes à faible vitesse pendant 10 à 15 secondes et centrifuger à 3000 tr/min pendant 20 secondes et les placer dans un appareil PCR en temps réel.4) Configuration RT-PCR

Réglez le volume de réaction sur 25μl et la procédure d'amplification PCR comme ci-dessous. Recueillir la fluorescence FAM

à 60°C et sélectionner AUCUN comme référence passive.Étape

Temp. Temps

nalyse et Interprétation  MatriceCT